최근완료된 연구과제

Home  최근완료된 연구과제

과제정보

과제정보
과제명 고위험병원체 면역학적 진단키트 제작 및 평가
기관명 보건복지부
담당부서 질병관리본부 감염병분석센터 고위험병원체분석과
전화번호 043-719-8275
연구기간 2018-05-10 ~ 2019-05-09
연구분야 질병관리본부 운영
개요 ○ 에볼라 등 고위험 출혈열바이러스는 감염성이 높아 국민건강에 심각한 위험을 초래할 수 있으므로 신속진단키트 등을 이용한 신속한 진단이 필수적이며, 보툴리눔 등 고위험독소의 경우 진단에 필요한 효소면역측정법(ELISA) 키트의 국내 제작·생산이 필요함
○ 이에 고위험병원체(보툴리눔독소E형, 황색포도알균장독소B형, 에볼라 및 라싸바이러스) 면역학적 진단키트를 제작·평가를 통하여 신속진단체계 확립으로 국가방역에 기여하고자 함

계약정보

과제정보
수행기관 (주)바이오노트 [기타]
수행연구원 김정호
계약일자 2018-05-10
계약방식 일반경쟁입찰에 의한 계약
계약금액 100,000,000원

연구결과 정보

과제정보
제목 고위험병원체 면역학적 진단키트 제작 및 평가
영문제목 Development and Evaluation of High-Risk pathogens Detection Kits
연구보고서 비공개
목차
Ⅰ. 연구결과 요약문
 (한글) 고위험병원체 면역학적 진단키트 제작 및 평가 
 (영문) Development and Evaluation of High-Risk pathogens Detection Kits

Ⅱ. 정책연구용역사업 연구결과
  제1장 최종 목표
  제2장 국내외 기술 현황
  제3장 최종 정책연구용역사업 내용 및 방법
  제4장 최종 정책연구용역사업 결과
  제5장 연구결과 고찰 및 결론
  제6장 연구성과 및 활용계획
  제7장 정책연구용역사업 진행과정에서 수집한 해외과학기술정보
  제8장 기타 중요변경사항
  제9장 연구비 사용 내역
  제10장 참고문헌
  제11장 첨부서류
초록
1. 보툴리눔독소 E형과 황색포도알균장독소 B형 진단 키트의 개발 보툴리눔독소 E형과 황색포도알균장독소 B형에 대한 재조합단백질을 제작하였다. 개발된 단백질 항원을 면역원으로 이용하여, 다수의 단클론항체를 생산하였고, 유효한 항체 원료를 선발하였다. 보툴리눔독소 E형 진단키트 개발에 사용할 선발된 원료는 질병관리본부 소유의 mAb a-BoNT/E 4G3-2와 Rabbit a-BoNT/E 항체 pair로 결정하였다. 황색포도알균장독소 B형 진단 키트 개발용으로는 mAb a-SEB 1P76과 mAb a-SEB 2P31이 최종 pair로 선발하였다. 선발된 원료를 이용하여 개발된 BoNT/E ELISA kit는 7.6ng/mL의 검출한계 성능을 확인하였고, SEB ELISA kit는 0.071ng/mL까지 SEB의 검출이 가능한 것으로 확인하였다. BoNT/E ELISA kit와 SEB ELISA kit 모두 음성 사람혈청에서 100% (50/50)의 특이도 성능을 확인하였다. 2. 라싸바이러스 신속진단키트 개발 라싸바이러스 NP와 GP에 대한 재조합단백질을 제작하였다. 개발된 단백질 항원을 면역원으로 이용하여, 다수의 단클론항체를 생산하였고, 유효한 항체 원료를 선발하였다. 라싸바이러스 NP에 대한 항체 원료는 mAb-Lassa NP 1P-44와 mAb-Lassa NP 1P-88 항체 pair가 선별되었으며, GP에 대한 항체원료는 선별하지 못하였다. Nucleoprotein만을 target으로 하여도 Lassa virus detection이 가능할 것으로 판단되어, Lassa virus Ag(NP) 진단 키트를 개발하였다. Lassa virus Ag(NP) 진단키트는 3.9ng/ml의 검출한계능을 확인하였고, 음성 사람혈청에서 100% (100/100)의 특이도 성능을 확인하였다. 또한 Yellow fever virus, Japanese encephalitic virus, Dengue virus, Malaria Plasmodium falciparum, Zika virus에 대해 교차반응성 없고, 17가지 물질에 대해 간섭반응 없는 것을 확인하였다. 3. 국내 생산 에볼라바이러스 신속진단키트 평가 에볼라 Zaire, Sudan, Bundibugyo, Tai Forest 4종의 VP40항원 대한 재조합단백질을 제작하였다. 개발된 단백질 항원을 개발된 에볼라 신속진단 시약에 적용한 결과 모두 detection가능 하였다. 에볼라바이러스 진단키트는 Zaire, Bundibugyo, Tai Forest에 대해 7.8ng/ml, sudan에 대해 1ug/ml의 검출한계능을 확인하였고, 음성 사람혈액에서 99% (199/201)의 특이도 성능을 확인하였다. 또한 Dengue, Influenza A, Influenza B, Leptospira interrogans (icterohaemorhagiae), Malaria Plamodium falciparum, Malaria Plasmodium vivax에 대해 교차반응성 없고, EDTA, Heparin, Sodium citrate에 대해 간섭반응 없는 것을 확인하였다. 4. 고위험 출혈열바이러스 신속진단키트의 현장적용 분석 본 과제에서 개발된 고위험 출혈열 바이러스 신속 진단 키트는 실험실 검사법 (PCR, 바이러스 분리 등) 결과가 나오기 전에 감염병 의심 환자의 스크리닝 목적, 치료 여부 모니터링 용도, 감염병 환자와 접촉 가능한 의료종사자의 감염여부 등을 검사하기 위한 용도로 사용될 수 있다.
 

1. 보툴리눔독소 E형과 황색포도알균장독소 B형 진단 키트의 개발
     보툴리눔독소 E형과 황색포도알균장독소 B형에 대한 재조합단백질을 제작하였다. 개발된 단백질 항원을 면역원으로 이용하여, 다수의 단클론항체를 생산하였고, 유효한 항체 원료를 선발하였다. 보툴리눔독소 E형 진단키트 개발에 사용할 선발된 원료는 질병관리본부 소유의 mAb a-BoNT/E 4G3-2와 Rabbit a-BoNT/E 항체 pair로 결정하였다. 황색포도알균장독소 B형 진단 키트 개발용으로는 mAb a-SEB 1P76과 mAb a-SEB 2P31이 최종 pair로 선발하였다.
    선발된 원료를 이용하여 개발된 BoNT/E ELISA kit는 7.6ng/mL의 검출한계 성능을 확인하였고, SEB ELISA kit는 0.071ng/mL까지 SEB의 검출이 가능한 것으로 확인하였다. BoNT/E ELISA kit와 SEB ELISA kit 모두 음성 사람혈청에서 100% (50/50)의 특이도 성능을 확인하였다.
  2. 라싸바이러스 신속진단키트 개발
     라싸바이러스 NP와 GP에 대한 재조합단백질을 제작하였다. 개발된 단백질 항원을 면역원으로 이용하여, 다수의 단클론항체를 생산하였고, 유효한 항체 원료를 선발하였다. 라싸바이러스 NP에 대한 항체 원료는 mAb-Lassa NP 1P-44와 mAb-Lassa NP 1P-88 항체 pair가 선별되었으며, GP에 대한 항체원료는 선별하지 못하였다. Nucleoprotein만을 target으로 하여도 Lassa virus detection이 가능할 것으로 판단되어, Lassa virus Ag(NP) 진단 키트를 개발하였다. Lassa virus Ag(NP) 진단키트는 3.9ng/ml의 검출한계능을 확인하였고, 음성 사람혈청에서 100% (100/100)의 특이도 성능을 확인하였다. 또한 Yellow fever virus, Japanese encephalitic virus, Dengue virus, Malaria Plasmodium falciparum, Zika virus에 대해 교차반응성 없고, 17가지 물질에 대해 간섭반응 없는 것을 확인하였다. 
  3. 국내 생산 에볼라바이러스 신속진단키트 평가
     에볼라 Zaire, Sudan, Bundibugyo, Tai Forest 4종의 VP40항원 대한 재조합단백질을 제작하였다. 개발된 단백질 항원을 개발된 에볼라 신속진단 시약에 적용한 결과 모두 detection가능 하였다. 에볼라바이러스 진단키트는 Zaire, Bundibugyo, Tai Forest에 대해 7.8ng/ml, sudan에 대해 1ug/ml의 검출한계능을 확인하였고, 음성 사람혈액에서 99% (199/201)의 특이도 성능을 확인하였다. 또한 Dengue, Influenza A, Influenza B, Leptospira interrogans (icterohaemorhagiae), Malaria Plamodium falciparum, Malaria Plasmodium vivax에 대해 교차반응성 없고, EDTA, Heparin, Sodium citrate에 대해 간섭반응 없는 것을 확인하였다. 
  4. 고위험 출혈열바이러스 신속진단키트의 현장적용 분석
     본 과제에서 개발된 고위험 출혈열 바이러스 신속 진단 키트는 실험실 검사법 (PCR, 바이러스 분리 등) 결과가 나오기 전에 감염병 의심 환자의 스크리닝 목적, 치료 여부 모니터링 용도, 감염병 환자와 접촉 가능한 의료종사자의 감염여부 등을 검사하기 위한 용도로 사용될 수 있다.
주제어 고위험병원체 면역학적 진단키트 제작 및 평가
발행년도 2019년

연구결과 평가 및 활용보고서

과제정보
평가결과서
활용결과 보고서 ※ 등록되지 않았습니다. (영 제52조에 따라 연구 종료 후 6개월 이내 등록)

공공누리 정보

공공누리
저작물
민간이용 동의
동의안함
비동의 사유 생물작용제 및 고위험병원체 관련 염기서열 노출 우려

연구결과 만족도

연구결과 만족도
참여인원 : 0명 점수: 0
연구결과 만족도 평가정보
no data found.

만족도 평가

연구결과 만족도 평가정보
*비밀번호